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人工授精技术

  (编者按:现在即将进入人工授精期,为了广大养殖户更好的掌握该技术、提高毛皮动物品质,本刊特搜集、整理了人工授精的有关技术,供大家学习借鉴。)
一、精液采集
狐人工授精第一步是采集公狐的精液。主要包括采精前准备。采精操作技术,采精频率和应注意事项
1、采精前的准备:首先是公狐的消毒,可先用肥皂水清洗公狐的阴部(阴茎、阴囊),因为此处油污较多。然后用清水冲净,再用1/1000百毒杀或新洁尔灭将公狐腹部毛浸湿。干湿程度应以不往下滴水为准。消毒液的温度应在40~50℃之间。因为温度过低会造成公狐性欲降低。
2、采精操作技术:经几十年的实践,国外狐人工授精最常用、最有效、对公狐刺激最小的方法是手按摩法。手按摩采精法:将公狐放在保定架内或辅助人员将狐保定好,辅助人员一手握颈钳夹住头颈部,另一手握住尾部,并将尾部适当提起,使公狐呈站立姿势。进行消毒后稍等1~2分钟,采精时左手握集精杯,右手轻轻按摩其阴茎,待勃起时把公狐阴茎由其两后腿中间拉向后方。左手作好接精准备,再快速按摩数次,即可出现射精。注意:①采精时动作的辐度与力度不能过大、过重。②当把公狐阴茎拉到后方后,应按摩阴茎球后方部分,动作尽量轻快。③集精杯一定要握全,保持与手温相同。④采精者手部不可过凉,以免降低公狐性欲。⑤射精的最先始,多混有尿液等杂物,不可接入集精杯。⑥采完精后应轻轻把充血的阴茎球按回原状,并把阴茎复位。
3、采精频率:应根据精子产生的数量决定。一般来说射精量大的频率宜低,但又因为不同个体间差异也大,耐高采精频率的能力主要是授遗传影响。而饲养管理也有一定影响。对于兰狐一般应每2天采精一次比较适宜。
二、检查精液品质(品质鉴定)
采取的精液必须立即进行。评定其质量,以便取舍,一般由以几种方法进行。
1、直观检查 (1)射精量:就是雄狐一次采精所射出精液的容积一般在0.5~2.5ml左右。(2)色泽:正常应为乳白色,灰白色的精液表示精子密度偏低,但也是正常的。如呈淡红色表示混有血液。精液有黄色或淡绿色是含有浓汁或混入尿液的表示,其他如带有深红、褐色等均为不正常精液。(3)气味:刚采出的精液略带腥味,如带其它异味则不正常。
2、显微镜检查:
(1)精子活力:精子活力与精子的授精能力有密切关系。方法:在载环片上滴一滴精液再用盖玻片盖在精液上面,使精液分布均匀。观察视野中具有直线运动的精子数目占视野内精子总数的百分之多少。用于输精的精子活率不可低于70%(放大400倍观察)。
(2)精子的密度:是在一定体积精液中精子的数量。测定的方法有以下两种。①估测法:与测定精子活力同时进行。在视野中的精子数×100万×稀释倍数=原精密度如:稀释后视察(稀释5倍) 视野中有60个精子。那么原精的密度为:60×100万×5倍=30亿/ml②计数法:运用血细胞计数器计数,使用红细胞吸管。方法:用吸管吸取原精液至所需要的度,然后吸取稀释液至101的刻度上,以拇指和食指分别按压吸管的两端,进行振荡混合均匀,而后弃去吸管前段不含精子的1~2滴,再向计数室与盖玻片之间的边缘滴一小滴,使精液渗入计数室内,即可在显微镜下检查计数,数出5个中方格(选择有代表性的四个角及中央各选一格即80个小方格)。计数室有中方格25个,每个中方格有16个小方格,整个计数室共有400个小方格。计数精子时,只需要查数5个中方格的精子数,而后推算1ml内的精子数,可按下列公式求出5个中方格的精子总数÷80(小方格数)×10(计数室高度)×200(稀释倍数)×400(小方格数)×1000(1ml=1000mm3)=1ml原精液的精子总数。为了减少误差,最好进行两次计算。如果两次误差大于10%,则应作第三次计算,然后计算出平均数。
(3)精子畸形率:畸形精子又叫变态精子。正常公狐精液内精子畸形率不应超过20%否则应废弃。①畸形精子的种类:巨型精子、短小精子、双头或双尾精子、头部或尾部残缺、尾部弯曲或弯向一侧、精子各部彼此粘连以及带有原生质滴的精子等。(4)有效精子数:具有授精能力的正常精子数量。计算公式:原精总数×精子活力(%)=有效精子数 根据计算出的有效精子数即可得出可输母狐只数。 公式如下: 可输母狐只数=有效精子数÷输精量/只母狐。以上所述测定项目是狐人工授精所常用的。
三、精液的稀释
精液在保存和输精之前,都要进行稀释,它可以增加精液数量,扩大配种只数,还可补充精子代谢所需的营养。消除副性腺分泌物对精子的有害影响。缓冲精子的酸碱度,给离体的精子创造适宜的环境,从而延长精子在体外的生存时间。因此正确的稀释精液,可以提高授胎率,同时也便于精液的保存。
1、鲜精稀释液的配制要求:
(1)能供给精子所需养分,延长其生存时间。如葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖等。
(2)渗透压应与精液相同
(3)酸碱度也应达到相同,并有一定缓冲作用。
(4)能抑制微生物的生长繁殖
(5)现用现配,并保持无菌操作
2、稀释精液时的要求:
(1)稀释液的温度应与精液温度相等(36~38℃)。稀释液应沿杯壁徐徐加入,与精液混合均匀,并保持无菌操作。
(2)如精液高倍稀释时,应先进行低倍(5~10倍)稀释,防止精子因所处环境突然改变而死亡或活力下降造成的稀释打击。精液在稀释后,立即进行镜检。如精子活力明显下降,说明操作过程或稀释液有问题,立即找出原因,加以改进。
所需加稀释液的数量(ml)=可输母狐数—原精的体积(ml)稀释后精液的保存
新鲜精液保存所用的方法为常温保存:将装有精液的试管放入水浴锅内温度恒定在30℃之间。(此温度可延长精子的存活时间)
(附录)
计算公式:
⑴精子活力=视野内直线运动的精子数÷视野内总精子数
⑵精子畸形率=视野内畸形精子数÷视野内总精子数
⑶精液密度=视野内的精子数×100万/ml
⑷精子总数=精液密度×精液体积(ml)
⑸ 有效精子数=精子总数×精子活力
⑹可输入母狐数= 有效精子数÷5000---10000万个有效精子/母狐
⑺稀释液添加量(ml)=可输入母狐数—精液体积(ml)
(下期我们将介绍输精技术及注意要点)
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